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令娟讲述iFOX-hunting突变体库

2017-11-23 22:38:55| 查看: 571|

11月17日晚,在华中农业大学图书馆一楼报告厅举行了第207期学术沙龙,由植物科学技术学院在读博士生令娟主讲.本期学术沙龙,令娟深入浅出地为大家介绍了iFOX-hunting突变体库的诞生过程,并以自己的亲身经历向我们讲述了如何进行植物体突变实验。

通讯作者:赵紫燕  成盛

11月17日晚,在华中农业大学图书馆一楼报告厅举行了第207期学术沙龙,由植物科学技术学院在读博士生令娟主讲。令娟师从张椿雨教授,主要研究脂肪酸代谢调控和茉莉酸代谢调控方面的内容,其中对用油菜功能基因组学研究的iFOX-hunting突变体库的成果已发表于Plant Biotechnol.J.。本期学术沙龙,令娟深入浅出地为大家介绍了iFOX-hunting突变体库的诞生过程,并以自己的亲身经历向我们讲述了如何进行植物体突变实验。

报告开始,令娟首先向大家介绍了常见的突变体库类型,其中主要分为功能缺失型突变体库和功能获得型突变体库。令娟分别对这两种突变体库的优缺点进行了较为详细地比较。功能缺失型突变体的优点主要在于插入整合完整,一般为单拷贝插入,诱变方便、高效,能鉴定到功能重复性基因,可彻底破坏单个基因、多拷贝基因或多个基因功能等;缺点则是其不能鉴定功能复合型的基因,一般表现为隐性突变,目标基因仍有少量表达,不能彻底破坏基因功能等;而功能获得型突变体的优点则是操作简便易行,诱变效果好,表型不受基因的拷贝数影响,但其基因的鉴定难度大,其应用也受材料转基因难易的影响。

随后,令娟向大家讲述了iFOX-hunting突变体库诞生的历程,同时她以自己对油菜的研究过程为例,进一步让大家了解了FOX hunting system的研究过程。针对油菜存在基因组过大,转基因效率低,存在多拷贝,单个基因无表型等问题,她认为构建功能获得型突变体库或许可以解决这些问题。但由于35S强启动子可能会引起基因沉默,强启动子引起的基因表达可能会严重影响植物的生长。为解决这一系列的难题,导师张椿雨教授采用iFOX hunting system进行试验研究。iFOX-hunting与FOX-hunting的区别主要在于诱导型启动子的使用。通过加入诱导剂,特异的诱导目的基因表达。其过程主要分为获取目标全长cDNA库、转化植物材料、筛选突变体三个部分。在讲述完技术具体步骤后,令娟向大家展示了筛选接近5000个株系后的实验成果。大约有36个有明显表型的突变体。之后,令娟针对其中一个会导致植物早衰的突变体进行了系统的研究工作,最终该成果发表于Plant Biotechnol. J.

本次学术沙龙的最后环节,令娟针对听众们所提出的“诱导剂是单一种子诱导,还是全部混合后再诱导?”“拟南芥产生的种子有明显区别吗?”“cDNA与载体是通过何种方式连接的?”等一系列问题都做出了详细地回答。在整个问答过程中,有的听众了解到了iFOX-hunting更具体的操作步骤,有的听众针对自己的实验有了新的启发,有的听众则提出自己的看法......大家都积极的参与了进来,此起披伏的提问声,给此期学术沙龙增添了一丝温暖,此次学术沙龙活动就在愉快的氛围中圆满结束。

审核人:李林